Size | List Price |
Promotion Price | Stock |
Purchase |
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50T | 1100.00 | 1100.00 | 3 |
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100T | 8000.00 | 8000.00 | 5 |
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图片描述: | ||||
100T |
一步法RT-PCR检测试剂盒
One Step RT-PCR Kit
目录号:QYR0604
产品内容
目录号 |
包装 |
QYR0604-50 |
50 ul × 50次 |
QYR0604-100 |
50 ul × 100次 |
产品简介
本试剂盒是专为一步法RT-PCR 实验研制的,逆转录和PCR在同一反应体系中进行,反应过程中无需添加试剂,无需打开管盖,在避免污染的同时提高了检测灵敏度和实验效率。本试剂盒包含的Super RTase逆转录酶,热稳定性好,反转效率高,同时具有很强的模板兼容性,可通读GC含量高及二级结构复杂的模板。热启动Taq DNA 聚合酶,扩增效率高,特异性强,能扩增出极微量的模板。One Step RT-PCR Buffer包含适用于逆转录和PCR 扩增的反应缓冲液和实验中所必需的反应组分,具有极强的兼容性,特别适合两种酶的反应要求。使用本试剂盒能安全、方便、快捷地实现一管内进行反转录和PCR扩增实验,扩增得到的目的产物3′端附有一个″A″碱基,可直接用于T/A 克隆。
产品特点
1. 安全、方便、快捷,所有反应都在一管内完成,避免了外源物质的污染及RNA的降解。
2. Super RTase耐热性及稳定性强,有很强的模板兼容性,可以高效转录GC含量高,二级结构复杂的RNA模板;
3. HotStart Taq Polymerase热启动DNA聚合酶,有很强的专一性和极高的灵敏性,扩增效率高。
4. 高效兼容的反应缓冲体系,保证逆转录酶和聚合酶同时发挥最大功效。
实验例
材料:10 mg大鼠肝脏组织,利用本公司通用型RNA提取试剂盒提取总RNA,100 ul RNase free ddH2O洗脱,1 ul上样电泳。
方法:
1. 利用本公司一步法RT-PCR检测试剂盒,扩增大鼠GADPH大小为400 bp片段,根据以下表格配置反应体系,总体积为50 ul。
试剂 |
50 ul反应体系 |
Taq /RTase Mix II |
2 ul |
2 × One Step RT-PCR Buffer |
25 ul |
正义引物 (10 uM) |
1 ul |
反义引物 (10 uM) |
1 ul |
模板RNA |
1pg~1 ug |
RNase free ddH2O |
Up to 50 ul |
2. 涡旋震荡混匀,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
3. 预热PCR仪到45℃,将PCR管置于仪器中,开始RT-PCR反应。
步骤 |
温度 |
时间 |
反转录 |
45℃ |
30 min |
PCR预变性 |
94℃ |
2 min |
变性 |
94℃ |
30 sec |
退火 |
60℃ |
30 sec |
延伸 |
72℃ |
30 sec |
终延伸 |
72℃ |
5 min |
4. 反应结束后取5 ul反应产物,加入适量上样缓冲液后进行电泳检测结果。
For more information, please download and refer to the product manual。