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一步法RT-PCR检测试剂盒 One Step RT-PCR Kit  
   Cat.No QYR0604    
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50T 1100.00 1100.00
3
   
100T 8000.00 8000.00
5
   
图片描述:
100T
Documentation and quality management
COA Datasheet
Basic product information:

一步法RT-PCR检测试剂盒

One Step RT-PCR Kit

目录号:QYR0604

产品内容

 

目录号

包装

QYR0604-50

50 ul × 50

QYR0604-100

50 ul × 100

 

产品简介

本试剂盒是专为一步法RT-PCR 实验研制的,逆转录和PCR在同一反应体系中进行,反应过程中无需添加试剂,无需打开管盖,在避免污染的同时提高了检测灵敏度和实验效率。本试剂盒包含的Super RTase逆转录酶,热稳定性好,反转效率高,同时具有很强的模板兼容性,可通读GC含量高及二级结构复杂的模板。热启动Taq DNA 聚合酶,扩增效率高,特异性强,能扩增出极微量的模板。One Step RT-PCR Buffer包含适用于逆转录和PCR 扩增的反应缓冲液和实验中所必需的反应组分,具有极强的兼容性,特别适合两种酶的反应要求。使用本试剂盒能安全、方便、快捷地实现一管内进行反转录和PCR扩增实验,扩增得到的目的产物3′端附有一个″A″碱基,可直接用于T/A 克隆。

 

产品特点

1. 安全、方便、快捷,所有反应都在一管内完成,避免了外源物质的污染及RNA的降解。

2. Super RTase耐热性及稳定性强,有很强的模板兼容性,可以高效转录GC含量高,二级结构复杂的RNA模板;

3. HotStart Taq Polymerase热启动DNA聚合酶,有很强的专一性和极高的灵敏性,扩增效率高。

4. 高效兼容的反应缓冲体系,保证逆转录酶和聚合酶同时发挥最大功效。

 

实验例

材料:10 mg大鼠肝脏组织,利用本公司通用型RNA提取试剂盒提取总RNA100 ul RNase free ddH2O洗脱,1 ul上样电泳。

 

方法:

1. 利用本公司一步法RT-PCR检测试剂盒,扩增大鼠GADPH大小为400 bp片段,根据以下表格配置反应体系,总体积为50 ul

试剂

50 ul反应体系

Taq /RTase Mix II

2 ul

2 × One Step RT-PCR Buffer

25 ul

正义引物 (10 uM)

1 ul

反义引物 (10 uM)

1 ul

模板RNA

1pg~1 ug

RNase free ddH2O

Up to 50 ul

2. 涡旋震荡混匀,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。

3. 预热PCR仪到45℃,将PCR管置于仪器中,开始RT-PCR反应。

 

 

步骤

温度

时间

反转录

45℃

30 min

PCR预变性

94℃

2 min

变性

94℃

30 sec

退火

60℃

30 sec

延伸

72℃

30 sec

终延伸

72℃

5 min

4. 反应结束后取5 ul反应产物,加入适量上样缓冲液后进行电泳检测结果。

 

Other technical information

For more information, please download and refer to the product manual。

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