NHS活化的琼脂糖凝胶 FF

名称：NHS活化的琼脂糖凝胶 FF（NHS-琼脂糖凝胶 FF）

英文名称：NHS Activated Agarose FF

目录号：QYP1058

规格：10ml, 50ml, 100ml

储存形式：凝胶混悬液，包含50% NHS-琼脂糖凝胶和50%保存液

保存液：100%异丙醇

储存温度：-20℃

产品介绍：
NHS-琼脂糖凝胶 FF是一种将琼脂糖凝胶微球用NHS活化形成的生物亲和层析分离介质。本试剂保留了琼脂糖极好的亲水性及大网架结构，与生物活性大分子有很好的相容性，具有载量高，非特异性吸附少，流速快等特点。本试剂能温和的与氨基基团反应，特别适合偶联抗体、链霉亲和素、酶、核酸等功能性生物大分子。

技术指标：

实验例：
实验名称：NHS-琼脂糖凝胶 FF偶联抗体。

耗材准备：层析柱空柱1个（柱体积6ml）

琼脂糖凝胶(ml)：配基(mg)：1：5-1：10。通常1：7偶联即可取得比较好的纯化效果。配基（抗体）密度可根据实验需要进行调整。

实验步骤：
1. 取7mg IgG, 加1 ml 偶联缓冲液(0.2 M NaHCO₃, 0.5 M NaCl, pH 8.3)溶解，也可用PBS(pH7.4)溶解。（抗体溶液留样20ul，以便测定偶联效率）

2. 将层析柱垂直放置，拔下上下盖，将底部筛板放入层析柱。取1 ml NHS-琼脂糖凝胶 FF（2ml凝胶混悬液），加入层析柱。凝胶保存液自然流出后，用10个柱床体积的1 mM HCl清洗柱子。

3. 盖上层析柱下盖。将溶解的抗体加入层析柱，盖上层析柱上盖。室温或4℃旋转摇床过夜，进行偶联。
4. 将层析柱垂直放置，拔下上下盖，使用50ml离心管收集标记后的抗体溶液。

5. 用10个柱床体积的PBS清洗偶联后的凝胶。

6. 向凝胶中加入1 ml封闭缓冲液(0.2 M NaHCO₃, 0.5 M NaCl, 0.5 M 乙醇胺, pH 8.3)，室温震荡2-3小时，以封闭未偶联的NHS-活性基团。

7. 将层析柱垂直放置，拔下上下盖。待封闭液流出后，用10个柱床体积的蒸馏水冲洗柱子。

8. 偶联完成的抗体-agarose柱加入5ml 20%乙醇-PBS溶液，盖上上下盖，4℃垂直保存。
9. 偶联前后的抗体溶液分别稀释7倍，SDS-PAGE电泳检测偶联效率。