中文名:DAPI
英文名:DAPI
CAS:28718-90-3 级别:生物技术级
分子量:350.25分子式:C16H17Cl2N5
纯度:>90%储存条件:-20℃干燥避光保存
产品简介
中文别名：4,’6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐；4',6-二脒-2-苯基吲哚 DAPI；
英文别名：DIHYDROCHLORIDE；DAPI；4',6-DIAMIDINO-2-PHENYLINDOLE,2HCL；2-(4-AMIDINOPHENYL)-6-INDOLECARBAMIDINEDIHYDROCHLORIDE；
物理性质：黄色粉末，易溶于水,最大溶解度为2.5％。
产品用途：DAPI荧光染料,可穿透细胞膜与细胞核双链DNA结合发挥标记作用,产生比自身强20多倍荧光,对双链DNA染色灵敏度高EB很多倍。显微镜下看显蓝色荧光细胞,荧光效率几乎为100%,且对活细胞无毒副作用.常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测.也用于普通细胞核染色及某些特定情况下的双链DNA染色。
DAPI，也称DAPI dihydrochloride，是一种常用的核酸染料，可以和双链DNA富含AT序列的小沟结合，产生比自身强20多倍的蓝色荧光。和EB(ethidium bromide)相比，DAPI对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。DAPI也可对RNA进行染色，染色机理是其可以选择性嵌入“AU序列”并发出荧光。相比DAPI-dsDNA(Ex/Em=358 nm/461 nm)，DAPI-RNA具有较长的最大发射波长(500 nm)，其荧光亮度仅有DAPI-dsDNA的20%。
尽管DAPI不能通过活细胞膜，但可以通过提高浓度使之进入活细胞。DAPI具有很高的光漂白承受水平，能用来检测酵母线粒体DNA，叶绿体DNA，病毒DNA，Microplasm DNA以及染色体DNA。
DAPI典型的蓝色荧光特性使其非常普遍的搭配其他绿色、黄色或红色荧光染料用于细胞生物学多色荧光标记技术，因此也常作为核酸和染色体的复染剂用于细胞凋亡检测、RNA原位杂交、直接或间接免疫检测等领域，其染色后可用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。推荐工作浓度为0.5-10 μg/mL。注意事项
1）DAPI对人体有一定刺激性，请注意适当防护。
2）荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。
3）为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
配制母液
用双蒸水溶解，终浓度为1-5 mg/mL。本产品不可以用缓冲液直接溶解。-20ºC可保存1年，建议分装保存，避免反复冻融。使用方法
1. 配制工作液：用双蒸水或PBS稀释母液，配制成所需要的工作的浓度（0.5-10 μg/mL），工作液可于4℃保存6个月。
2. 固定的细胞或组织染色：对于固定的细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。DAPI染色通常在其他染色的最后进行。如果不需要进行其它染色，则直接进行DAPI 染色。
a）对于贴壁细胞或组织切片：加入适量DAPI染色液，覆盖住样品即可。
对于悬浮细胞：至少加入待测染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3-5分钟。
b）吸除DAPI染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。
c）直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长360 nm，发射波长460 nm。
3. 活细胞或组织染色：
a）细胞培养物中加入适量DAPI染色液，约1/10细胞培养基体积，必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1 mL染色液，对于96孔板一个孔需加入100 μL染色液。
b）在 37℃培养细胞 10～20 分钟。
c）用 PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
d）直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长360 nm，发射波长460 nm。
COA
