概述

造血干细胞（ hematopoietic stem cell，HSC）是指骨髓中的干细胞，具有自我更新及多向分化能力，在体内外诱导条件下，可最终分化为包括红细胞、白细胞和血小板等各种血细胞成分，可长期重建造血功能和免疫功能。HSC移植是治疗白血病、再生障碍性贫血、自身免疫性疾病和某些实体瘤的有效手段。自1989年首次利用脐血干细胞移植治疗范科尼贫血报道以来，脐血干细胞移植受到了广泛的关注。

培养方法概述

与CD34单抗标记的造血干细胞不仅可以通过FACS分选分离，也可通过其它不同的免疫吸附技术分离。免疫吸附分离的基本过程是先将与特异性CD34单抗结合的细胞通过某种亲和力量吸附于特定的吸附物上，然后通过一定的方法将分离的 CD34＋细胞自吸附物上洗脱并收集。常用的分离 CD34＋细胞的免疫吸附方法有亲和柱层析、汰洗和免疫磁性分离三种。

亲和柱层析

利用生物素（biotin）和抗生物素蛋白（avidin）间的亲和力来分离细胞的方法，其基本过程是将悬浮MNC与生物素连接的CD34单抗孵育标记，标记好的标本通过抗生物素蛋白过滤柱， CD34＋细胞被保留于过滤柱，然后通过振荡洗脱收集纯化的 CD34＋细胞。现在临床分离CD34＋细胞中应用最多的由CellPro, Inc. 开发的自动细胞分离仪Ceprateâ系统即为这一方法的代表。

汰洗法（Panning）

这一方法的代表是Applied Immune Sciences（AIS）, Inc.的CELLectorâ系统。基本过程是将MNC置于已通过共价黏附SBA处理的多聚乙烯塑料瓶中孵育，SBA凝聚RBC、B和T淋巴细胞、单核细胞和基质细胞而初步富集1.5-5倍的 CD34＋细胞，再将未黏附的初步富集的细胞转移至通过共价黏附CD34单抗（ICH3）的塑料瓶中，CD34＋细胞即黏附于瓶内，而后通过振荡洗脱即收集到纯化的 CD34＋细胞。

免疫磁性分离

这一方法是通过直接或间接的方式将CD34单抗标记的细胞与特殊的顺磁性微珠连接，连接微磁珠的细胞经过放置于强磁场中的过滤柱时被吸附，而未连接微磁珠的细胞则被过滤掉，去除磁场后通过冲洗即收集到纯化的CD34＋细胞.这一类的商品化分离仪主要有Isolexâ系列（Baxter Biotech）和Miltenyi 生物技术公司的MACS系列，应用于临床分离CD34＋细胞的有Isolexâ 300和CliniMACS。