实时荧光定量PCR技术

实时荧光定量PCR （Real-time PCR）技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出，荧光定量PCR所使用的荧光化学可分为荧光探针和荧光染料两种。由于该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR相比，它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点，已得到广泛应用。

实时荧光定量PCR技术原理

所谓的实时荧光定量 PCR就是通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。在实时荧光定量 PCR 反应中，引入了一种荧光化学物质，随着 PCR 反应的进行，PCR 反应产物不断累计，荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环，收集一个荧光强度信号，这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化，从而得到一条荧光扩增曲线图。

实时荧光定量PCR技术操作步骤